上一篇《菌和虫一起测，才算数》讲了分子鉴定。它有一个前提——DNA 得还在。
加工过的产品里，这个前提经常不成立。 高温、粉碎、提取，都会让 DNA 降解。
2018 年有人换了条路。
一、思路：改查蛋白质
《3 Biotech》2018 年（童鑫鑫等，通讯作者郭金林）。
作者对现有方法的评价很直接：
现有方法主要依赖 DNA 测序，但这些方法不适合已加工产品，因为 DNA 缺乏或降解。
蛋白质相对更耐受一些，所以他们去找蛋白层面的标志物。
二、怎么找的
一套组合拳：
- 二维电泳（2-DE） + MALDI-TOF/MS
- 碱性原生梯度 PAGE（AN-PAGE） + ESI-Q-TOF/MS
说人话：先把蛋白按两个维度分开摊在胶上，再用质谱一个一个认出来。
三、找到了 22 个
结果是 22 种特征性蛋白，其中被点名的有：
- 氰酸水合酶（Cyanate hydratase）
- 烟酸磷酸核糖转移酶
- 甘油-3-磷酸脱氢酶
关键的一句是：
这 22 种特征蛋白存在于所有冬虫夏草样品中，但在任何伪品中均未发现。
四、然后做成了一个能用的检测
找到标志物只是第一步。作者接着建立了间接 ELISA 检测方法。
ELISA 的好处是便宜、快、不需要质谱那种大设备——理论上能做成筛查工具。
验证结果：
| 样品 | P/N 比值 |
|---|---|
| 3 份真品 | 均高于 8 |
| 3 份伪品 | 均低于 1 |
差了将近一个数量级，区分度很清楚。
五、但样本只有三对
这一点必须写出来：真品 3 份、伪品 3 份。
三对样品，不足以证明这个方法在真实市场上的表现。 它证明的是「这条路走得通」，不是「这个方法已经可用」。
从「原理验证」到「能出一份市场上认的报告」，中间还隔着方法标准化、大样本验证、机构资质这几道——这跟我们在《验产地的下一条路，可能在「虫」那一半》里说的是同一种距离。
六、把三种方法放在一起看
| 方法 | 强在哪 | 弱在哪 |
|---|---|---|
| 形态鉴别 | 免费、即时、日常最实用 | 要练眼力；粉末失效 |
| 分子（PCR） | 不依赖形态，极微量可测 | 加工品 DNA 降解则失效；分不出混合粉末 |
| 蛋白（ELISA） | 加工品也能测 | 目前样本量小，尚未成熟 |
三种方法的共同点是：越是完整的原草，越好验；越是加工过的，越难验。
这条规律没有例外。 所以我们的选择一直很简单——只卖整根，见《我们为什么不做粉、不做胶囊、不做片剂》。
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出处：Tong X-X 等（通讯作者 Guo J-L），Proteomic identification of marker proteins and its application to authenticate *Ophiocordyceps sinensis*，*3 Biotech*，2018 年 5 月，DOI: 10.1007/s13205-018-1265-4。
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不买也没关系——看完知识库再决定，不迟。
